1) Обнаружение каталазы в листьях элодеи. В процессе дыхания одним из первичных промежуточных продуктов является вредная для клеток перекись водорода. Каталаза разлагает перекись водорода на воду и молекулярный кислород по уравнению 2Н2О2 каталаза 2H2O + O2. На предметные стекла в каплю 3 %-ного раствора перекиси водорода помещают старые и молодые, а также убитые кипячением листья элодеи. Перекись водорода проникнет в клетки листьев и будет расщепляться ферментом каталазой на воду и кислород. Под микроскопом будет видно бурное выделение пузырьков кислорода из листьев. Выделение пузырьков тем интенсивнее, чем активнее каталаза в листьях. В каких листьях (старых или молодых) активность каталазы выше? Сохраняется ли фермент каталаза в убитых листьях?
2) Обнаружение дегидраз в семенах фасоли. Набухшие семена фасоли очищают от кожуры и разламывают на две части (семядоли). Часть семядолей убивают кипячением в течение 10 минут. Живые и убитые половинки семян помещают в две небольшие фарфоровые чашки, в каждую приливают 0,5 %-ный раствор хлористого тетразолия и ставят на 20-30 минут в термостат с температурой 37о. В живых половинках семян под действием дегидраз клетки окрасятся в ярко-красный цвет из-за образования окрашенного вещества – формазана. Убитые половинки семян не окрасятся. Для опыта можно взять не половинки семян, а свежие бритвенные срезы.
3) Обнаружение пероксидазы. Метод основан на том, что бензидин в присутствии перекиси водорода под действием фермента пероксидазы переходит в коричневый оксибензидин. Для приготовления реактива растворяют 1 г бензидина в 200 куб, см дистиллированной воды, нагретой до 80о. Для лучшего растворения колбу нужно энергично встряхивать. Раствор охлаждают и перед употреблением фильтруют. К 50 мл раствора добавляют 1 мл 0,1 %-ной перекиси водорода. Свежеприготовленные срезы стебля растений помещают в каплю реактива на предметном стекле. Через 3-5 минут в местах локализации пероксидазы содержимое клеток окрасится в коричневый цвет.
Если раствор бензидина слегка подкислить уксусной кислотой, то в местах локализации пероксидазы появится синее окрашивание.
*****
Рекомендую посетить бесплатное рекламное пространство, представленное на страницах сайта - cataloxy.ru. Например, здесь можно найти все фирмы и
компании в городе Иваново. Данный каталог позволит Вам найти любое предприятие города.