«В качестве лабораторных крыс»: Фриске, Хворостовский, Кобзон стали жертвами экспериментов западных фармацевтов - доктор наук
14 октября 2018
Сенсационные и шокирующие заявления конспирологов, указывавших на то, что повальная «эпидемия» смертей представителей отечественного шоу-бизнеса, является частью тщательно спланированной операцией западных производителей лекарственных препаратов, оказались правдой, доказанной российскими медиками.
Жанна Фриске, Дмитрий Хворостовский, Иосиф Кобзон и еще многие популярные артисты, певцы и эстрадные комики, удивительным образом покинули этот мир после лечения в дорогостоящих клиниках Запада и Израиля. По мнению доктора медицинских наук Александра Ермоленко, который начал собственное расследование, все российские звезды стали жертвами экспериментов фармацевтов. Причина такого использования россиян в качестве «лабораторных крыс» кроется, по меньшей мере, в двух аспектах. Во-первых, российские звезды были изначально настроены на полное доверие к западной медицине, а потому, не жалели средств на процедуры и операции, которые в родном отечестве обошлись бы дешевле.
Во-вторых, любой гражданин России ассоциируется с «диктаторским режимом» Путина, а поэтому западное судопроизводство может не обращать внимания на исковую объективность. Самое главное обстоятельство заключается в готовности российских звезд оплачивать применение не сертифицированных препаратов, о чем, кстати, ни они ни их родные не догадывались.
Ермоленко уверен, что заговор западных фармацевтов продолжает действовать. Если еще несколько десятилетий назад неопробированная разработка нового препарата стоила до ста долларов и могла применяться в муниципальных клиниках, то современные разработки лекарств от, допустим, онкологии или кардиологических патологий слишком дороги, чтобы испытывать их только за счет государственных субсидий. Это шок, этому можно не верить, но достаточно прочитать список российских звезд, ушедших за последнее десятилетие после лечения в престижных зарубежных клиниках. https://yandex.ru/turbo?text=https%3A%2F%2Fvistanews.ru%2Fscience%2F272731&d=1
*****
ПОЧЕМУ УХОДЯТ ЗВЁЗДЫ. СТРАННАЯ КЛЕТКА. МОЛОДОСТЬ СЛИШКОМ ДОРОГО СТОИТ.
Почему последнее время стало много смертей среди звёзд первой величины российского шоу бизнеса? Что такое омоложение с помощью стволовых клеток.
*****
Страсти по стволовым клеткам. Заворотнюк, Фриске, Хворостовский и другие жертвы инъекций красоты
Лидия Новоселецкая, Фокус
17 сентября 2019, 18:25
На днях стало известно о неизлечимой агрессивной болезни звезды сериала «Моя прекрасная няня» Анастасии Заворотнюк, которой полгода назад поставили страшный диагноз – рак головного мозга. По слухам, диагноз совпадает с причиной смерти другой российской знаменитости – Жанны Фриске, которой не стало в 2015 году после непродолжительной борьбы со страшным недугом
Однако, Жанна и Анастасия – не единственные медийные персоны, которые стали жертвами внезапно начавшейся онкологии. За последние 12 лет из жизни ушли актрисы Вера Глаголева, Любовь Полищук и Анна Самохина, актеры Александр Абдулов и Олег Янковский, писатель-сатирик Михаил Задорнов, оперный певец Дмитрий Хворостовский. Ходят слухи о том, что причиной смерти Людмилы Гурченко также стала онкология развившаяся после омолаживающих процедур, а не возрастные изменения в организме, хотя, актрисе действительно было больше лет, чем другим знаменитостям, ушедшим из жизни внезапно, к тем же причинам причисляют и смерть Майи Плисецкой.
Все перечисленные знаменитости обращались к услугам специалистов за омолаживающими процедурами, которые продразумевали инвазивную терапию стволовыми клетками.
Известно, что влияние стволовых клеток на организм при косметических процедурах, да еще и в сочетании с индивидуальным состоянием здоровья пациентов, до конца не исследовано. Однако эксперименты, проведенные в 2016 году доказали, что введение этих биологических материалов увеличивает вероятность образования вредных мутаций.
Те же исследования показали, что данная методика инвазивной терапии в сочетании с различными косметическими препаратами способны вызывать непредсказуемое, стихийное деление клеток, которое может быстро превратиться в злокачественную опухоль.
Считается, что результат от омолаживающих инъекций стволовых клеток держится примерно 3 года и понижает биологический возраст пациента примерно на 15-20 лет. При этом, считается, что такое омоложение подразумевает не только устранение морщин, а и омоложение всего организма.
Процедура омоложения стволовыми клетками заключается в том, что у пациента берут небольшое количество жировой ткани, затем из нее выделяют и выращивают стволовые клетки. В свою очередь стволовые клетки представляют из себя недоразвившиеся клетки, которые способны и если их выращивают в лабораторных условиях, они способны дифференцироваться в иные структурные единицы, которые, в свою очередь образуют новые ткани.
Чаще всего, источником таких «недоклеток» бывают клетки взрослого человека (самого пациента), культивированные из клеток жировой ткани, костного мозга, печени или крови.
Многочисленные опыты, проведенные учеными в Техасского Института Биологических наук и технологий с целью выявления влияния стволовых клеток на появление и рост раковых опухолей показали, что такая взаимосвязь действительно не исключена. Особенно, когда речь идет об эмбриональных стволовых клетках, ко е могут стать любой клеткой в организме.
Однако, стремление знаменитостей оставаться молодыми заставляет их игнорировать возможные страшные последствия.
Пожалуй, самым резонансным случаем можно считать внезапную болезнь и смерть певицы Жанны Фриске в 2015 году, в возрасте 40 лет. Ей был поставлен диагноз, аналогичный тому, от которого умирает Анастасия Заворотнюк – а именно, неоперабельная злокачественная опухоль головного мозга. Двумя годами позже (в 2017) о того же диагноза умер оперный певец Дмитрий Хворостовский.
Актер Олег Янковский ушел из жизни в возрасте 65 лет от рака поджелудочной железы. По словам членов семьи знаменитости, первое время после процедур он чувствовал себя прекрасно. Он забыл о морщинах. Но за год до смерти актер обратился в клинику, где ему поставили диагноз ишемия. Врачи оставили актера под наблюдением в кардиологии. Состояние актера становилось все более тяжелым. Его мучили боли и частая рвота. Новое обследование показало последнюю стадию рака поджелудочной железы с обширными метастазами.
За год до Олега Янковского умер Александр Абдулов, который проходил процедуры омоложения в той же клинике, что и Янковский. К слову, именно Абдулов уговорилил коллегу выбрать такой метод омоложения. Звезда «Формулы любви» и «Карнавала» умер в возрасте 54 лет от рака легких.
В 2017 году, после ряда омолаживающих процедур стволовыми клетками, неутишительный диагноз карценома желудка поставили Вере Глаголевой. Актриса умерла на 62 году жизни. А в 2010 году мир покинула другая яркая звезда советского кино – Анна Самохина. Актриса также проходила терапию стволовыми клетками в одной из клиник Москвы и довольно скоро начала жаловаться на сильные боли в желудке. Обследование выявило последнюю стадию рака желудка.
На 57 году жизни скончалась любимая многими актриса – Любовь Полищук – коллега Анастасии Заворотнюк по сериалу «Моя прекрасная няня». Для Любови работа в сериале стала последней. Страшные диагноз – саркома позвоночника актрисе поставили во время съемок в телевизионном проекте и в 2006 году знаменитости не стало.
***** способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей
Изобретение относится к области медицины и касается приготовления клеточных трансплантатов. Сущность изобретения: из фетальных тканей абортивного плода 17-21 недели внутриутробного развития выделяют клетки различных органов, суспендируют, отбирают суспензии с повышенным содержанием региональных стволовых клеток, отдельные идентифицированные культуры РСК, региональные бластные клетки, обладающие повышенными миграционными свойствами, дифференцированные клетки, специализированные клетки (типа бета-клеток поджелудочной железы) и биологически активные вещества из фетальных тканей, при этом количество клеток в трансплантате (Т) от 25х104 до 10х107 жизнеспособность всех клеток, составляющих Т, не менее 80-90%, экспрессия антигенов гистосовместимости II класса не более 8-15%; спонтанная активность Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы не менее 0,1 условной ед.; индуцированная активность Са2+/Mg2+ -зависимой эндонуклеазы 0,3 - 9 у.е., представленность маркера CD 95 - не более 5%. Клеточный трансплантат может включать дополнения, например ростовые факторы, и/или факторы миграции, и/или специфические белки, и/или антиоксиданты и т.д. Клеточные трансплантаты, полученные из фетальных тканей предлагаемым способом, эффективны и безопасны при использовании их при лечении широкого круга заболеваний. 9 з.п.ф-лы.
Изобретение относится к области медицины и касается приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей для лечения широкого круга заболеваний.
В современной медицине отчетливо сформировалось отдельное направление, использующее тканевые и клеточные трансплантаты в терапевтических целях. Одним из научно-практических результатов этого направления является признание того, что фетальные ткани и клетки и их ассоциаты, а также биологически активные вещества из них обладают большей терапевтической эффективностью, чем зрелые ткани и дифференцированные клетки взрослого человека. Это обусловлено особыми свойствами клеток в период эмбриогенеза.
Прежде всего, в клетках II триместра гестации еще не экспрессированы белки гистосовместимости I и II класса и поэтому при трансплантации они не вызывают иммунной реакции отторжения.
Во-вторых, эти клетки в значительно большей степени способны использовать эволюционно более древний энергетический путь - гликолиз и в связи с этим обладают большей устойчивостью к гипоксии, чем дифференцированные клетки взрослого человека. С терапевтической точки зрения это свойство важно в случаях, связанных с лечением ишемии органов и тканей реципиента, с технологической - для создания банков клеток и их ассоциатов с глубоким замораживанием, которое влечет за собой резкое снижение концентрации кислорода.
В-третьих, фетальные клетки очень пластичны и способны направленно изменять свои функции и свойства в зависимости от сигналов из окружающей среды, в том числе и от сигналов клеток реципиента. Последнее заставляет клетки мигрировать из области трансплантации в область конечной локализации и дифференцироваться в клетки соответствующей ткани. Именно это свойство высокой морфно-функциональной пластичности лежит в основе так называемой терапевтической полипатентности фетальных клеток и тканей.
Наконец, фетальные клетки в большей степени, чем клетки взрослого человека, содержат ростовые факторы, факторы миграции, стадиоспецифические белки, антиоксиданты и перехватчики активных форм кислорода, адаптогены, противовоспалительные бактериостатические соединения.
Таким образом, терапевтический эффект фетальных трансплантатов зависит не только от количества имплантированных фетальных тканей, клеток и их ассоциатов, но и от строгого соблюдения условий, обеспечивающих содержание в трансплантате клеток, обладающих всеми перечисленными выше уникальными свойствами.
Сегодня трудно перечислить все области применения фетальных тканей, клеток или препаратов на их основе. Достаточно сказать, что уже в настоящее время ряд клиник США и Европы успешно применяют фетальные клетки и ткани дефектов метаболизма печени, системных врожденных иммунодефицитов, нарушение гемопоэза, а также для лечения пациентов с мышечной дистрофией, дегенеративными заболеваниями нервной ткани, нарушениями репродуктивной системы, костной и хрящевой тканей, кожных покровов и т.д. Применение фетальных клеток в терапевтических целях стало возможным в связи с прогрессом в молекулярной и клеточной биологии, иммунологии, генной инженерии и других, смежных с перечисленными областях науки. В настоящее время не остается сомнений в эффективности фетальных клеток человека и вопрос их широкого применения в клинической практике больше связан с по меньшей мере двумя проблемами: во-первых, с разработкой технологий обеспечения безопасности трансплантата и технологий управления его эффективностью или терапевтической полипатентностью, во-вторых, с разработкой технологий получения нозологически специфических форм трансплантата.
Технической задачей настоящего изобретения является способ приготовления клеточного трансплантата с использованием биоматериалов из абортивного плода, позволяющий сохранить терапевтическую полипатентность этих биоматериалов и обеспечить безопасность метода, управляя качеством трансплантата на всех стадиях и этапах. Этот способ включает в себя подготовку трансплантата из фетальных тканей, получение суспензий для последующего получения компонентов клеточных трансплантатов и составление композиций трансплантата. Обеспечение безопасности трансплантата реализуется на основе комплексного подхода с исследованием на контаминацию донора плода, окончательной инъекционной формы трансплантата, а также с учетом условий сохранения антиканцерогенных свойств и гистосовместимости клеток трансплантата с клетками реципиента.
Установлены объективные количественные критерии качества трансплантата с учетом количества клеток в трансплантате, оценки жизнеспособности всех клеток, составляющих трансплантат, экспрессии антигенов гистосовместимости II класса, спонтанной активности Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы, индуцированной активности Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы, а также представленности маркера CD 95.
Для решения поставленной задачи предлагается способ приготовления клеточного трансплантата, согласно которому из фетальных тканей абортивного плода 17-21 недели внутриутробного развития весом 150-450 грамм выделяют клетки различных органов, их суспендируют, затем отбирают суспензии с повышенным содержанием региональных стволовых клеток, отдельные идентифицированные культуры региональных стволовых клеток, региональные бластные клетки, обладающие повышенными миграционными свойствами, дифференцированные клетки, специализированные клетки (типа бета-клеток поджелудочной железы) и биологически-активные вещества из фетальных тканей, при этом количество клеток в трансплантате от 25способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112104 до 10способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112107, жизнеспособность всех клеток, составляющих трансплантат, не менее 80-90%, экспрессия антигенов гистосовместимости II класса не более 8-15%; спонтанная активность Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы не менее 0,1 условной ед.; индуцированная активность Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы от 0,3 до 9 условных ед.; представленность маркера CD 95 - не более 5%. Клеточный трансплантат может дополнительно включать ростовые факторы и/или факторы миграции, и/или специфические белки, и/или антиоксиданты, и/или переносчики активных форм кислорода, и/или адаптогены, а также вещества, обладающие противовоспалительным, бактериостатическим действием. Клеточный трансплантат может быть использован при исследовании на контаминацию донора абортивного плода, исследований на контаминацию абортивного плода, контроле стерильности тканевых суспензий.
При составлении трансплантатов подбирают ткани и клетки, которые в наибольшей степени утратили свою функцию.
При лечении молодых пациентов трансплантаты содержат больше дифференцированных клеток и/или композиции биологически активных веществ для стимуляции собственных региональных стволовых клеток. Для старых и пожилых пациентов в трансплантате преобладают региональные стволовые клетки.
При лечении рассеянного склероза трансплантат должен содержать преимущественно клетки промежуточной области мозга, которые в наибольшей степени способны к миграции.
Трансплантаты для лечения больных ишемической болезнью сердца должны содержать миоциты, бластные клетки печени, легкого, селезенки, сосудистого эндотелия. При лечении анемий - региональные гемопоэтические клетки.
Клеточные трансплантаты могут быть использованы при лечении заболеваний нервной, эндокринной систем, нарушениях обмена веществ, болезнях крови, кроветворных органов и отдельных нарушениях, вовлекающих иммунные механизмы, для лечения новообразований, болезней глаз и его придаточного аппарата, уха и сосцевидного отростка, системы кровообращения, органов дыхания, органов пищеварения, болезней кожи и подкожной клетчатки, костно- мышечной системы и соединительной ткани, отдельных состояний, возникающих в перинатальном периоде, травм, отравлений.
Для приготовления трансплантата необходимы абортивные плоды 17-21 недели внутриутробного развития весом 150-450 г. Допускается хранить в холодильнике при 4oC не более 4 ч. Это обеспечивает выход клеток с жизнеспособностью не ниже 85% (в тесте с трипановым синим). Абортивные плоды содержащие менее 70% жизнеспособных клеток, не могут быть использованы для подготовки трансплантата.
Ограничивающие условия определены нами опытным путем в результате анализа жизнеспособности клеток от 112 плодов (p<0,05). В работу принимаются плоды без генетических аномалий и без нарушений целостности кожных покровов.
Плод тщательно обрабатывают раствором детергента и отмывают дистиллированной водой. Пуповину отделяют. Затем забирают следующие органы: тимус, сердце, легкие, печень, селезенка, поджелудочную железу, надпочечники, почки, гонады, желудок, тонкий кишечник, брыжейка, спинной мозг, щитовидную железу, глаза. Кроме того, выделяют хрящи из всех суставов плода и снимается кожа с живота и спины. Перед разделением тканей мозга мозговые оболочки обязательно отделяются и в дальнейшем используются для получения клеточных культур. Из головного мозга забирают: мозжечок, мозговой ствол, эпифиз, гипоталамус, таламус, базальные ядра, затылочные доли, теменные доли, височные доли, лобные доли. Гипофиз не изолируется вместе со всем мозгом и может быть отделен в последнюю очередь.
Органы измельчают в стерильной чашке Петри стерильными, острыми ножницами до визуально гомогенного состояния, затем в гомогенат, добавляют 10 - 15 мл охлажденного (+4oC) стерильного физраствора и суспендируют стерильной пипеткой. После этого одноразовым шприцом через иглу 0,8х38 производят дополнительную гомогенизацию. Полученный гомогенат переносят в стерильные центрифужные пробирки, содержащие 5-кратный объем охлажденного (+4oC) стерильного физраствора. Пробирку оставляют на 3-5 мин для осаждения недезагрегированных кусочков ткани, затем надосадочную жидкость, содержащую отдельные клетки, отбирают и переносят в другую стерильную центрифужную пробирку. Осадок, содержащий кусочки ткани, подвергают дополнительной механической или энзиматической дезагрегации. Суспензию клеток центрифугируют в течение 10 мин при 1000 оборотах в мин, после чего надосадочную жидкость сливают.
Суспензии, прошедшие контроль стерильности, могут использоваться сразу в виде трансплантата из отдельных тканей, композиций тканей, передаваться на хранение в банк либо служить исходным биоматериалом для получения клеточных трансплантатов.
Проверенный на стерильность материал суспендируют в среде для замораживания - 10% DMSO (в качестве криопротектора) и 90% эмбриональной сыворотки теленка, затем помещают в криопробирки (Costar), по 1,5 мл (2-50способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112106 клеток/пробирку) и замораживают в парах жидкого азота со скоростью 1oC/мин до -40oC и 5oC/мин - 70oC. После этого охлажденные криопробирки с суспензией помещают в жидкий азот в сосуды Дьюара (35 литров, Sigma), либо в хранилища для биопродуктов (ХБ-0.5, Свердловский завод кислородного машиностроения).
Хранящиеся в банке суспензии находятся в криопробирке емкостью 2 мл или 4 мл, содержащую стерильную гомогенную жидкость от светло-желтого до розово-оранжевого цвета с концентрацией клеток от 1 млн. в мл до 50 млн. в мл.
Срок хранения суспензии в жидком азоте - 3 года.
Ограничивающее условие определено нами опытным путем на основе анализа жизнеспособности 167 образцов суспензий (p<0,05).
Замороженную суспензию (по 1 ампуле из каждой партии) быстро размораживают при 60oC, отмывают физраствором для удаления среды для замораживания (центрифугирование в течение 1-2 минут при 1000 об/мин) и окрашивают витальным красителем трипановым синим по стандартной методике. Жизнеспособность клеток должна составлять не ниже 80%. Если этот показатель ниже, то такие образцы отбраковывают. При строгом соблюдении режима замораживания и последующем быстром размораживании жизнеспособность, как правило, составляет 80-95% (общая статистика 70, уровень значимости p<0,05).
Теоретически идеальным трансплантатом является тот, который содержит 100% РСК. Однако простой расчет показывает, что для получения достаточного только для одной трансплантации РСК необходимо в сотни раз увеличить количество исходного абортного материала. Поэтому практически, для подготовки трансплантата, используют абортный материал более поздних чем 15 недель сроков гестации, когда количество РСК резко возрастает, применяют культивирование РСК, добавляют частично дифференцированные клетки, а также стимулируют "спящие" камбиальные РСК реципиента ростовыми факторами, цитокинами или другими биологически активными веществами, содержащимися в фетальных тканях.
Таким образом, основными компонентами трансплантата являются РСК, частично дифференцированные, специализированные клетки и биологически активные вещества, стимулирующие регенерацию собственных РСК реципиента.
В настоящее время уже установлено место первичной локализации РСК для разных органов и тканей. Это было сделано с применением тонких дорогостоящих методов, что затрудняет использование их в технологическом процессе при широкой практике подготовки и применения трансплантата.
Предлагается к патентованию технологически более подходящий способ определения наибольшей плотности: региональных стволовых клеток. Способ заключается в том, что в образцах суспензий, полученных из областей первичной локализации РСК, определяют уровень аноптотической активности по CD 95 и наличие на поверхности этих клеток антигенов гистосовместимости II-класса HLA-DR. Опыт применения этих двух методов одновременно для определения образца суспензий с наибольшей плотностью РСК позволяет получить от 75 до 85% жизнеспособных РСК, что достаточно для дальнейшего их культивирования
Общая статистика - 87 измерений. Вариабельность по тканям от 6 до 8 измерении. Уровень значимости - p<0,05 - 0,001.
Культивирование РСК проводят в специальных условиях, не позволяющих, им дифференцироваться.
При выращивании клеток в недифференцирующих условиях, культура РСК может поддерживаться не более одного года.
Ограничивающее условие получено нами опытным путем на основании анализа жизнеспособности 8 образцов РСК (p<0,05)
Если РСК поместить в условия, позволяющие ей дифференцироваться, то через примерно 3 недели можно получить специализированные клетки, практически не отличающиеся от клеток из области окончательной их локализации. При этом все они будут нести антигены гистосовместимости II-класса (HLA-DR). Такого рода клетки добавляют в трансплантат в качестве источника композиции биологически активных веществ для стимуляции собственных репаративных механизмов реципиента, поскольку они распознаются и уничтожаются иммунной системой больного, в результате чего высвобождаются эти биологически активные вещества.
Опытным путем нами получено, что терапевтическая эффективность такого рода клеток резко падает после 3-5 пассажей.
Ограничивающее условие получено при N =12 (p<0,05)
Ограничивающее условие получено при N = 47 (p<0,05)
Все процедуры производятся при 0oC. В максимально "мягких" условиях из ткани готовится гомогенат на дистиллированной воде и (или) изотоническом растворе хлорного калия (11,5 г на 1 литр дистиллированной воды - 15% раствор). В последнем случае гомогенат центрифугируют при 600g 10 мин и осадок из неразрушенных клеток и обрывков разрушенных клеток используют для тестирования. Далее следует этап центрифугирования при 12000g в течение 15 мин - оседают митохондрии - осадок используется так же, как и первый, т.е. как осадок 600g. Следующий этап центрифугирование постмигохондриальной надосадочной жидкости при 105000g в течение часа - получение осадка мембран эндоплазматического ретикулума. Фракции осадка, кроме осадка 600g, ресуспендируют в дистиллированной воде и (или) дополнительно могут быть "озвучены" на 3 ДН с целью солюбилизации периферического белка мембран и разрушения компонентов субклеточных структур, содержащих растворимые белки и биоактивные пептиды.
Испытания фракции проводятся или в виде самой фракции как таковой или после экстракции пептидов по известным (общепринятым) методикам. Экстракты для характеристики пептидного состава подвергаются ВЭЖ хроматографии.
В случае приготовления гомогената ткани на дистиллированной воде, последний готовится в максимально жестких условиях: допустимо повторное замораживание-оттаивание, дополнительное озвучивание на ультразвуковом дезинтеграторе (3 Д) при максимальной мощности и т.д. Гомогенат центрифугируется при 105000g в течение 1 часа. Во всех случаях допустим этап лиофильной сушки осадка или супернатанта с целью концентрации материала.
Инъекционная форма трансплантата готовится из суспензий, полученных сразу после препарирования абортного плода, из замороженных тканевых и клеточных суспензий различных органов, из отдельных идентифицированных культур РСК, региональных бластных клеток, дифференцированных клеток, а также из композиций биологически активных веществ из фетальных тканей. Она представляет собой стерильную пробирку с мутноватой жидкостью от светло-желтого до розово-оранжевого цвета.
Для получения отчетливого эффекта в тансплантате должно содержаться от 25способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112104 до 10способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112107 жизнеспособных клеток.
В настоящее время существует несколько методических подходов к паспортизации. Среди них можно выделить: иммуноцитохимические методы, методы оценки ферментативной активности, метод проточной цитофлуориметрии.
Иммуноцитохимические методы используются только для идентификации клеток, прикрепленных к субстрату (пластик, стекло) и готовых к дифференцировке. Идентификацию проводят по реакции на специфические мембранные маркеры или по наличию специфического биологического продукта этих клеток.
Методы изучения ферментативной активности клеток, входящих в состав трансплантата, дают возможность оценить норму реакции наиболее важных для жизнеспособности и ферментов (в том числе и ядерных ферментов) в ответ на различные индукторы. Примером использования ферментативных методов является оценка индуцированой активности Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы.
На основании накопленного нами опыта впервые для паспортизации предлагается использовать метод проточной цитофлуориметрии, позволяющий одновременно в одном и том же образце трансплантата оценить основные показатели сохранности терапевтической полипатентности водящих в состав трансплантата компонентов. В результате применения этого метода впервые установлено, что трансплантат с оптимальной терапевтической полипатентностью должен отвечать следующим требованиям: количество клеток в трансплантате от 25способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112104 до 10способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, патент № 2160112107, жизнеспособность всех клеток, составляющих трансплантат - не менее 80-90%, экспрессия антигенов гистосовместимости II класса не более 8- 15%, спонтанная активность Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы не менее - 0,1 условной ед. , индуцированная активность Ca2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы - от 0,3 до 9 условных ед., представленность маркера CD 95 не более 5%.
Общая статистика - 375. Вариабельность по показателям от 30 до 85. Уровень значимости p<0,05 - p<0,001.
Немаловажное значение при составлении трансплантата имеет учет возраста больного. При всех прочих равных условиях трансплантат для лечения более молодых пациентов должен содержать больше дифференцированных клеток и/или композицию биологически активных веществ для стимуляции собственных РСК реципиента, в то время как в трансплантате для пожилых и старых пациентов в подавляющем большинстве должны преобладать РСК.
При составлении клеточного трансплантата следует ориентироваться, как на основное заболевание, так и на породившие его причины. Так, например, при ишемической болезни сердца эффективность лечения выше, если в трансплантате присутствуют не только миоциты, но и бластные клетки печени, легкого, селезенки и сосудистого эндотелия. Трансплантат, составленный для лечения рассеянного склероза, должен состоять преимущественно из клеток промежуточной области мозга, которые в наибольшей степени способны к миграции, а трансплантат для лечения анемий должен состоять из региональных гемопоэтических клеток.
Клеточные трансплантаты могут быть составлены для лечения болезни эндокринной системы, расстройства питания и нарушения обмена веществ, болезни крови, кроветворных органов и отдельные нарушения, вовлекающие иммунный механизм, новообразования, болезни глаз и его придаточного аппарата, болезни уха и сосцевидного отростка, системы кровообращения, органов дыхания, органов пищеварения, кожи и подкожной клетчатки, костно-мышечной системы и соединительной ткани, отдельные состояния, возникающие в перинтальном периоде, травмы, отравления.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ приготовления клеточного трансплантата из фетальных тканей, характеризующийся тем, что из фетальных тканей абортивного плода 17 - 21 недели внутриутробного развития весом 150 - 450 г выделяют клетки различных органов, суспендируют их, отбирают суспензии с повышенным содержанием региональных стволовых клеток, отдельные идентифицированные культуры региональных стволовых клеток, региональные бластные клетки, обладающие повышенными миграционными свойствами, дифференцированные клетки, специализированные клетки (типа бета-клеток поджелудочной железы) и биологически активные вещества из фетальных тканей, при этом количество клеток в трансплантате от 25 х 104 до 10 х 107, жизнеспособность всех клеток, составляющих трансплантат, не менее 80 - 90%, экспрессия антигенов гистосовместимости II класса не более 8 - 15%; спонтанная активность Са2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы не менее 0,1 условной ед.; индуцированная активность Са2+/Mg2+ - зависимой эндонуклеазы от 0,3 до 9 условных ед.; представленность маркера СД 95 - не более 5%.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что клеточный трансплантат дополнительно включает ростовые факторы, и/или факторы миграции, и/или специфические белки, и/или антиоксиданты, и/или переносчики активных форм кислорода, и/или адаптогены, а также вещества, обладающие противовоспалительным, бактериостатическим действием.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что клеточный трансплантат, полученный предложенным способом, может быть использован при исследовании на контаминацию донора абортивного плода, исследовании на контаминацию абортивного плода, контроле стерильности тканевых суспензий.
4. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что при составлении трансплантатов подбирают ткани и клетки, которые в наибольшей степени утратили свою функцию.
5. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что трансплантаты для лечения молодых пациентов должны содержать больше дифференцированных клеток и/или композиции биологически активных веществ для стимуляции собственных региональных стволовых клеток.
6. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что в трансплантате для старых и пожилых пациентов должны преобладать региональные стволовые клетки.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что трансплантаты для лечения больных ишемической болезнью сердца должны содержать миоциты, бластные клетки печени, легкого, селезенки, сосудистого эндотелия.
8. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что трансплантаты для лечения рассеянного склероза должны содержать преимущественно клетки промежуточной области мозга, которые в наибольшей степени способны к миграции.
9. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что трансплантат для лечения анемий должен состоять преимущественно из региональных гемопоэтических клеток.
10. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что клеточные трансплантаты могут быть использованы при лечении заболеваний нервной системы, болезнях эндокринной системы, нарушениях обмена веществ, болезнях крови, кроветворных органов и отдельных нарушениях, вовлекающих иммунные механизмы, для лечения новообразований, болезней глаз и его придаточного аппарата, болезней уха и сосцевидного отростка, болезней системы кровообращения , болезней органов дыхания, болезней органов пищеварения, болезней кожи и подкожной клетчатки, болезней костно-мышечной системы и соединительной ткани, состояний, возникающих в перинатальном периоде, травмах, отравлениях и других последствиях воздействия внешних причин. http://www.freepatent.ru/patents/2160112
*****
Онкологическая пандемия уносит жизни российских артистов. Как распознать признаки заболевания на ранней стадии?
В июне 2015 года врач одной из лучших мировых клиник, расположенных в США, не стал скрывать от великого оперного певца Дмитрия Хворостовского правды: «Вам осталось жить не более 18 месяцев», - констатировал он.
Этот срок истек ровно год назад, в конце 2016-го. Великолепная физическая форма актера, титанические усилия, которые он противопоставил болезни в неравной схватке с ней, воля к жизни и, конечно, любовь миллионов российских зрителей помогли ему прожить еще год. Целый год, на протяжении которого он давал концерты и… прощался с любившей его аудиторией.
В прямом эфире своей передачи на телеканале РТР Андрей Малахов сказал: «Дмитрий был предан спорту. Практически каждая наша встреча начиналась с разговора о тренировках, здоровом питании».
О любви Хворостовского к здоровому образу жизни сказал и адвокат Павел Астахов: «Встречаясь с Дмитрием, мы могли устроить соревнования, кто больше отожмется на одной руке. Или плавали наперегонки».
Зловещее совпадение! Ушедший из жизни две недели назад Михаил Задорнов тоже вел здоровый образ жизни, не ел мяса и удивлял своих поклонников, делая сальто или стоя на голове в финале многих своих выступлений.
Каков итог? «Задорнова невозможно было спасти, - говорит сегодня его близкий друг Иосиф Кобзон. – С самого начала у него были поражены оба полушария головного мозга.
А Жанна Фриске? Певица ушла в самом расцвете сил 2 года назад после тяжелой, изменившей ее до неузнаваемости борьбы.
Борис Ноткин, один из самых галантных ведущих нашего телевидения, предпочел «уклониться» от болезненно-изнуряющего поединка с онкологическим заболеванием, приобретя ружье и выстрелив себе в голову на даче. Он оставил записку, признавшись, что у него закончились силы.
Смерть звезд вызывает резонанс, но давайте не будем забывать, что «тихий убийца» — рак! — уносит жизни не только тех, кто имеет возможность противопоставить болезни серьезные финансовые ресурсы. 8 млн человек ежегодно умирает от онкологии, делая рак «мировым лидером» по причине смертности населения земного шара.
Данные, которые регулярно обнародует Минздрав России, очень тревожны. Сегодня от онкологии страдают 2,8 млн граждан нашей страны. Врачи не скрывают: эта цифра имеет тенденцию к росту!
Главный онколог медицинского центра Управления Делами Президента РФ России Михаил Давыдов еще 4 года назад констатировал неудовлетворительное положение вещей в части диагностики рака на ранней стадии в Российской Федерации и отметил несовершенство отечественной противораковой службы.
Но при этом авторитетный ученый, академик РАН утверждает, что своевременно выявленная начальная стадия рака дает человеку шанс на спасение.
— Рак — это фатальное заболевание, — сказал в одном из своих интервью Михаил Иванович, посвятивший свою жизнь борьбе с онкологией. Но если его своевременно диагностировать и правильно лечить, то больные живут с этим диагнозом десятилетиями.
Как понять, что у тебя рак? О симптомах, которые должны насторожить любого человека, в диалоге с корреспондентом «РП» рассказал врач-онколог высшей квалификационной категории Антон Михайлиди.
Русская Планета (РП): Антон Евгеньевич, многие связывают начало онкологического заболевания со снижением веса, потерей аппетита, быстрой утомляемостью…
Антон Михайлиди (АМ): Что бы не происходило в вашем организме, паниковать никогда не стоит. Многие факторы, как упомянутая вами потеря веса, конечно же, могут свидетельствовать и об онкологии. Но иногда усталость – это просто усталость. В то же время, здоровое внимание человека к своему самочувствию, каким-то странным изменениям, происходящим в организме, никогда не повредит. Иногда это помогает вовремя прийти к врачу, обследоваться, узнать правду о состоянии здоровья, какой бы страшной она не была, и получить соответствующее лечение. Но приходить в ужас от родинки, которую вы раньше не замечали, не стоит.
РП: Что именно должно насторожить человека? Каковы первые симптомы рака?
АМ: При поражении злокачественной опухолью разных органов человека первичные симптомы разнятся. Например, меняется привычный цвет ногтей. Порой так проявляется меланома (прим. авт. – рак кожи). У пациентов при раке легких утолщаются кончики пальцев, которые даже на приеме у доктора могут быть ошибочно приняты за артрит. Или бывает, что у человека вдруг начинают кровоточить и болеть десна.
РП: Разве это не проблема стоматологического характера?
АМ: Далеко не всегда! Иногда это очень яркий симптом лейкемии. Повторюсь, одни и те же симптомы могут быть как признаком онкологического заболевания, так и «проявлять» другие проблемы со здоровьем. К примеру, боли в спине – могут быть следствием неосторожного перенапряжения, поднятия тяжестей. Но если они долго не проходят – надо обязательно провериться.
РП: Как болит спина, если это рак?
АМ: Не стоит думать, что если она болит «именно вот как-то так», то это «приговор». Нет! Только обследование, биохимия, консультация со специалистами могут подтвердить или опровергнуть опасения. Но надо понимать, что затяжные боли в верхней части спины бывают при раке легких. А если болит в ее нижней части – так иногда проявляется опухоль предстательной железы. Насторожить должна и банальная одышка. Не всегда это «сердце» или «возраст»! Порой, это признак рака легких, как, собственно, и не прекращающийся долгое время кашель.
РП: Сейчас сезон простуд. Люди кашляют в общественном транспорте, на улице, на работе. Как отличить кашель простудный от кашля при онкологии?
АМ: При онкологии кашель может быть и сухим, и влажным, с выделением мокроты. Но других простудных «явлений» при кашле, который характерен для рака легких, чаще всего, нет.
РП: Коллега-курильщик в редакции кашляет не первый день – ему пора «сдаваться»?
АМ: Обследоваться. Как минимум бесплатно пройти флюорографию в любой районной поликлинике, сходить к терапевту, сдать биохимический анализ крови. Аналогичные меры обязательно нужно принять, если не первую неделю держится невысокая температура 37,1-37,3º. И уж, конечно, нужно действовать, если общий анализ показывает скачок СОЭ.
РП: Буквально за один месяц ушли от нас Дмитрий Хворостовский, Михаил Задорнов, не захотев бороться с болезнью, покончил с собой Борис Ноткин. Два года назад мы наблюдали за страшной болезнью Жанны Фриске. Эти люди умерли от онкологического поражения головного мозга. Что вы можете сказать о причинах и симптомах этой формы рака?
АМ: Представьте себе ситуацию. Сейчас скользко, человек идет по улице, упал, сломал ногу. Его увезли на «Скорой», наложили гипс, прошло время, нога заживает, все неплохо. Но есть «поломки» на генетическом уровне, которые приводят к онкологии. Эти нарушения незримы для человека. И когда в головном мозге возникает опухоль, человек не подозревает об этом. Продолжает жить, как жил. Симптомов при маленькой опухоли нет! Но она растет, приходит боль. Вы пойдете с головной болью к врачу?
РП: Я нет. Болит – и ладно. Но ведь «мигренью» дело не ограничивается?
АМ: Бывает, что нарушается чувствительность. Человек не жаловался на процессы пищеварения, а тут вдруг – рвота по утрам. У Михаила Задорнова болезнь проявилась прямо во время концерта судорожным припадком, хотя доподлинно известно, что человек никогда не страдал эпилепсией. А у других могут произойти изменения в модели поведения.
РП: Например?
АМ: Все, опять-таки, двойственно. У депрессии, ряда психических расстройств и опухоли мозга есть «точки пересечения». Человек может стать неопрятен. Могут проявиться какие-то изменения в характере. Конечно, все это может быть ситуативно обусловлено: проблемы на работе, в семье, нет настроения или просто все надоело. Но, к сожалению, бывает, что это вторичный симптом рака головного мозга.
РП: Опухоль головного мозга не операбельна?
АМ: Почему? Летом прооперирован американский сенатор Маккейн. Но о возвращении к прежней жизни после такой операции не может быть и речи.
РП: То есть, полного исцеления не бывает?
АМ: Нет. Но всегда остается надежда на чудо. И в моей практике были случаи, которые я до сих пор не могу себе объяснить. Наверное, у многих врачей они были.
РП: Рак у курильщика – дело понятное. А что же случилось у Задорнова, Хворостовского, которые занимались спортом и были настоящими адептами ЗОЖ? Образ жизни человека влияет на появление опухоли?
АМ: Вопрос в шансах. Фразу «Жизнь – это игра» принято воспринимать, как некую метафору, абстракцию. А на самом деле своим образом жизни мы постоянно уменьшаем или повышаем шансы остаться здоровыми! Это так! Конечно же, те, кто курит, как паровоз, в десятки раз увеличивают свои шансы на то, чтобы заболеть. Но правда в том, что огромная вероятность заболеть раком есть также у человека, который генетически предрасположен к онкологическим заболеваниям и живет абсолютно здоровой жизнью. Ведь то, что сделала Анжелина Джоли (прим. авт. – известная американская актриса удалила молочные железы) – не причуда, не безумие, а вполне обоснованный с научной точки зрения шаг. Риск заболеть раком молочной железы у нее был запредельно высок.
РП: Бытует мнение, что рак мозга – заболевание XXI века, дескать, не было никаких опухолей еще в прошлом столетии, а теперь это заболевание вызывают мобильные телефоны, их вредное излучение…
АМ: Количество онкологических заболеваний растет. Но влияние высоковольтных линий передач и сотовых телефонов на возникновение опухолей головного мозга пока опровергнуто, хотя вопрос продолжает изучаться. Могу привести в пример результаты исследования австралийских ученых, которые в прошлом году в авторитетном журнале «Cancer Epidemiology» опубликовали результаты исследования, опровергающего эту связь.
РП: Эксперимент с заболевшими раком мышами, на которых воздействовали дозами излучения, аналогичными излучению мобильных телефонов, можете прокомментировать?
АМ: Насколько я знаю, исследования и эксперименты продолжаются.